伊河团头鲂染色体的组型

摘要：利用腹腔注射秋水仙素制备肾细胞染色体的方法，对伊河团头鲂的染色体组型进行研究。结果表明，其二倍体数目为2n=48，核型公式为2n=10m+30sm+8st，染色体总臂数为88。

关键词：伊河团头鲂；染色体；核型

中图分类号： S965.119.1；S917.4文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0188-02

收稿日期：2013-05-29

基金项目：现代农业产业技术体系建设专项（编号：nycytx-49-34）；国家科技基础条件平台-水产种质资源平台项目；河南省重点攻关项目（编号：112102110054）。

作者简介：张芹（1980—），女，河南辉县人，硕士，畜牧师，主要从事鱼类遗传育种研究。E-mail：zhangqin.2007@163.com。古语有“洛鲤伊鲂，贵于牛羊”的美称，这其中的“伊鲂”，就是产于河南伊河的团头鲂（简称伊河鲂）。伊河鲂历史悠久，味道鲜美，是款待贵宾的佳肴。19世纪20年代以来，由于生态环境的恶化、水域的污染和过度捕捞等，使黄河流域生物多样性遭到严重破坏，渔业资源不断衰减。不仅如此，近十几年来由于黄河连年断流，给中下游乃至河口地区的渔业资源和生态环境造成灾难性的影响，一些名贵鱼类品种已难见踪迹。河南省境内黄河支流上的洛河鲤鱼和伊河鲂如今也已基本绝迹，对于这些珍稀品种的保护工作刻不容缓。本研究对伊河鲂染色体进行了研究，逐步开展该种质资源的鉴定工作。

1材料与方法

1.1材料

伊河鲂取自河南省嵩县陆浑水库，共10尾，体长26.4～56.5 cm，体重为256.6～2 381.6 g。试验用鱼暂养在温室中，水温（25±1） ℃。

1.2试验方法

1.2.1染色体标本的制备参照林义浩植物血细胞凝集素（PHA）体内注射法[1]，并根据实际情况加以改进。按照 2 μg/g 的剂量向试验鱼注射秋水仙素，2.5 h后剖腹取肾脏。肾脏在0.75%生理盐水中清洗2～3遍，充分剪碎，用纱布过滤除去血块及其他组织，再加入适量生理盐水，反复吹打，制成细胞悬液，1 000 r/min离心5 min，收集细胞；加入预热的低渗液（0.037 5 mol/L KCl），37 ℃低渗25～30 min。在低渗后的细胞悬液中加入固定液（甲醇 ∶冰醋酸=3 ∶1）1 mL，1 000 r/min 离心8 min，弃上清；加固定液5 mL，吹打均匀后室温固定30 min，离心，重复固定1次；最后一次离心保留约5倍细胞体积的上清液制成细胞悬液，取-20 ℃预冷载玻片倾斜45°滴片，每片1～2滴，迅速在酒精灯上烤干。10% Giemsa 液（pH值=6.8）染色20 min，蒸馏水冲洗，自然干燥后封片。

1.2.2核型分析选取100个分散良好的细胞，观察统计，确定染色体2n数目。选取10个数目完整、长度适中、着丝点清楚、2条单体适度分开、形态清晰的分裂相进行显微摄影，对每条染色体确认着丝点位置，分别测量长臂和短臂。计算其相对长度和臂比值，并按Levan提出的标准[2]进行配对、分类排列组型。

2结果与分析

2.1染色体数目

在显微镜下对伊河鲂分散良好的100个染色体中期分裂相进行计数，结果（图1、表1）表明，染色体为48条时，分裂相最多，有82个，由此确定伊河鲂的二倍体染色体数目是48条。

2.2染色体组型

伊河鲂的肾细胞染色体组型见图2。按照Levan命名法，依据伊河鲂染色体臂比及相对长度可以将其染色体分成4组，中部着丝粒染色体（m）10条，亚中部着丝粒染色体（sm）30条，亚端部着丝粒染色体（st）8条。每组按相对长度和臂比进行同源染色体配对，其中中部着丝粒染色体（m）共配成5对，亚中部着丝粒染色体（sm）共配成15对，亚端部着丝粒染色体（st）共配成4对。由此可知，伊河鲂染色体核型公式为2n=10m+30sm+8st，染色体总臂数为88（表2）。

3结论与讨论

染色体是鱼类遗传的物质基础，对鱼类的遗传、变异起重要作用。染色体核型研究能够反映物种的分化与形成过程、亲缘关系、演化途径和进化历史，对于研究鱼类的遗传、变异、分类地位、系统演化、性别和杂交育种等都具有重要意义。因此，本研究分析了伊河鲂的染色体核型，对其细胞遗传学特征进行深入了解，为该鱼种质检测提供相应标准参数，也为伊河鲂的系统演化、进化地位的确定提供基础资料，同时也为伊河鲂遗传育种工作提供了科学依据。

参考文献：

[1]林义浩. 快速获得大量鱼类肾细胞中期分裂相的PHA体内注射法[J]. 水产学报，1982，6（3）：201-208.

[2]Levan A，Fredga K，Sandberg A A. Nomenclatrue for centrometric position on chromosomes[J]. Hereditas，1964，52（2）：201-220.

[3]余来宁，柳凌. 淤泥湖团头鲂染色体组型和二倍体细胞DNA含量分析[C]//主要淡水养殖鱼类种质研究.北京：农业出版社，1991：157-162.

[4]宗琴仙，柯鸿文，郝思平，等. 五种水体团头鲂的染色体数目、组型以及电泳分析[J]. 水产科技情报，1987（3）：1-4.

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