CD29和EGFR在乳腺癌中的表达及临床意义

对照采用已知CD29和EGFR阳性的胃癌组织切片，阴性对照采用PBS液替代1抗[5]。鼠抗人CD29、EGFR单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒及DAB显色试剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 免疫组化结果判读 CD29阳性表达定位于肿瘤细胞浆和/或细胞膜，呈棕黄色。EGFR阳性表达定位于肿瘤细胞浆，呈棕黄色。随机选取10个高倍镜（×400）视野计数阳性细胞≥5%者为阳性病例，≤5%者为阴性病例[6]。

1.4 统计学处理 所有数据资料采用SPSS 16.0软件进行，计数资料以率（%）表示，比较采用 x2检验；CD29与EGFR表达相关性研究采用Spearman秩和相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD29、EGFR的表达情况 CD29、EGFR在乳腺癌中的阳性表达率分别为70.4%（69/98）、62.2%（61/98），均明显高于在腺病中的阳性表达率5.8%（3/52）、3.8%（2/52），差异均有统计学意义（P<0.05）。典型情况见图1、2。

2.2 CD29、EGFR的表达情况与临床病理指标的关系 CD29、EGFR的表达与病理分型、分化程度、淋巴结转移情况均有相关性（P<0.05）；与患者的年龄、肿瘤大小均无关（P>0.05），见表1。

2.3 CD29、EGFR在乳腺癌组织中表达的相关性 采用Spearman秩和相关分析数据显示，CD29和EGFR在乳腺癌组织中的阳性表达呈正相关性（r=0.375，P<0.05）。

3 讨论

乳腺癌目前是我国女性最常见的恶性肿瘤之一，且发病率仍有逐年增高的趋势。虽然随着新的治疗手段特别是分子靶向药物的出现，乳腺癌患者的生存率有了明显上升，但目前只有约30%的患者可达到临床治愈的效果得以长期生存，而大部分患者在根治性手术治疗后仍然会出现肿瘤复发和远处转移的情形。乳腺癌的治疗效果及预后与很多因素有关，其中最重要的是癌组织的侵袭与转移能力。近年来研究发现，CD29和EGFR在多种恶性肿瘤组织中出现过表达的情况，同时在肿瘤细胞表面的分布也发生改变，这与肿瘤细胞的增殖扩散和新生血管的形成密切相关；而且两者还存在相互协同作用，进而影响肿瘤的侵袭和转移[7]。本研究结果显示，CD29和EGFR在乳腺癌中阳性表达率均显著高于腺病（P<0.05），说明两者对乳腺癌的发生起到一定作用。

整合素（Integrin）属于细胞粘附分子家族，是由α和β两个穿膜糖蛋白亚基非共价形成的跨膜异二聚体[8]。其胞外区与分布在相邻细胞及细胞外基质的分子配体相结合后，胞内区与细胞骨架及多种信号分子相连，产生焦点粘合物，这样不仅可以介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的相互黏附，而且可以介导细胞与细胞外基质之间的双向信号传导，进而参与细胞的分化、增殖、迁移等多种生物学行为的调节[9-10]。粘附因子CD29即整合素β1链，是在细胞表面分布最广的整合素家族成员。有动物实验证实，CD29抗体能抑制胚胎血管形成过程中管腔的形成[11]，因此CD29在乳腺癌中的过表达还有利于侵袭转移病灶中新生血管的形成。近年研究也显示CD29参与肿瘤血管生成、侵袭转移等病理过程，其表达与肿瘤细胞的侵袭能力密切相关。但是，研究发现CD29在不同肿瘤中的表达情况差异较大[12]。本研究结果显示，CD29在乳腺癌中的表达与患者的年龄、肿瘤大小均无显著相关性（P>0.05），同时在浸润性癌、高级别癌、有淋巴结转移病例中的阳性表达率均显著高于原位癌、低级别癌及无淋巴结转移病例（P<0.05），说明CD29的表达是随着肿瘤的进展、病理级别的增高及淋巴结转移的出现而升高的，说明其在肿瘤的发展侵袭转移等生物学行为中具有促进作用，可以成为乳腺癌的一种预后指标以及潜在的分子靶向作用靶點。

EGFR是上皮生长因子（EGF）促使细胞增殖和进行信号传导的受体，属于酪氨酸激酶型糖蛋白受体。文献[13]研究发现，在许多恶性肿瘤中存在EGFR的高表达或异常表达。文献[14]研究表明，EGFR的过度激活能促进肿瘤细胞的克隆性增殖，抑制细胞凋亡。其可能机制有：EGFR的高表达引起下游信号传导的增强；突变型EGFR受体或配体表达的增加导致EGFR的持续活化；受体下调机制的破坏；异常信号传导通路的激活等[15]。EGFR的配体还可以通过自分泌形式激活EGFR促进细胞增殖。此外，研究发现EGFR可以通过Ang-1及VEGF等因子水平的调节而影响肿瘤血管生成，从而影响肿瘤的侵袭性及转移能力[16]。通过本研究可以看出，EGFR在乳腺癌中的表达情况和CD29是相类似的：其阳性表达率也是随着肿瘤的发展、分化程度的降低以及淋巴结转移的出现而升高的，说明EGFR对乳腺癌的恶性生物学行为起着重要的促进作用，

文献[17]研究发现，在多种恶性肿瘤的发生发展以至侵袭转移的过程中，整合素与EGFR之间的“协同效应”起着重要作用。两者的相互作用主要表现在以下几方面：（1）整合素的交联可以引起EGFR的聚集，进而响应表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）信号途径活化Rho因子，导致细胞骨架重排，促进肿瘤细胞的侵袭和转移。而EGF的信号也可引起整合素的重新分布，促进细胞伪足的生成，以利于肿瘤细胞对周边组织的侵袭[18]。（2）整合素可以和神经调节蛋白1（Neurigulin 1，

NRG 1）的EGF結构域结合形成三元复合物，进而促进肿瘤的生长[19]。（3）EGFR还能促进整合素的表达，进而激活Src蛋白，导致游离的肿瘤细胞对凋亡信号的抵抗。（4）有研究显示单独的整合素β1链即CD29可以与EGFR形成复合物，放大EGFR通路信号，活化信号转导和转录激活因子，从而促进癌细胞的增殖与侵袭[20]。

本研究结果显示，EGFR和CD29在乳腺癌中的表达呈正相关性，说明两者的过表达在乳腺癌的发生进展、浸润及转移等方面都存在着协同效应。而且试验结果还显示随着乳腺癌的进展，越是侵袭性强、分化差、转移能力强的病例，两者的表达率均相应增高，说明CD29和EGFR的过表达对乳腺癌患者的预后可以起到一定的提示作用。同时针对CD29和EGFR在乳腺癌发生发展过程中的这种协同作用机制，也给肿瘤分子靶向治疗提供了新药的研究方向和治疗靶点。

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