碱性蛋白酶产生菌培养分离和酶活力测定

对照测定各管的吸光度（A680），以酪氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

二、结果和分析

1.菌株的筛选。经酪蛋白培养基培养后，在培养基上产生明显透明圈的只有4种菌株，将其编号为1，2，3，4号，据测量发现菌株2和3的D/d值比较大，同时也比较接近，而菌株1和4的D/d值比较小，菌株的比值最大。

2.菌株分类。菌体特征：表面褶皱，扁平而大白色；表面光滑，小也有突起淡黄色；表面相对光滑，高耸而大黄色；菌落边缘褶皱，高耸而大白色

3.菌株酶活力的测定。由多组数据点0.165，0.213，0.464，0.406，0.772等得出标准曲线的方程式：y=-0.036+0.0147x、25度下各菌株酶活力测定结果如下。

三、结论与讨论

从富含蛋白质的土壤中分离出来的4种菌株都具有产生碱性蛋白酶的能力，并对它们各自的菌落特征进行记录。经测定25度下各菌株酶活力，得知酶活力的强弱。通过实验可以获得酶活力比较高的菌株，但是还是不能满足工业等生产的实际应用。

参考文献：

[1]李鹏，苗增良，王健鑫.舟山海域一株碱性蛋白酶海洋放线菌的鉴定、选育及发酵条件的初步研究[J].海洋与湖沼.2014，45（5）； 1127-1136.

[2]Godfrey，T.，and S.West 1996.Industrial enzymology[M]，2nded.，p.3.Macmillcan Publishes.，New York，N.Y.

[3]Mala B.Rao，Aparma M.Tankasle，Mchini S.Ghatge，et al.Molecular and Biotechnologicl aspects of microbial.

[4] 李鹏，苗增良，王健鑫.舟山海域一株碱性蛋白酶海洋放线菌的鉴定、选育及发酵条件的初步研究[J].海洋与湖沼. 2014，45（5）； 1127-1136.

[5]肖怀秋，林亲录，李玉珍，赵谋明.微生物碱性蛋白酶研究进展[J].中国食品添加剂.2005，（05）；60-64.

[6]邱秀宝，袁影，戴宏，等.嗜碱性芽孢杆菌碱性蛋白酶的研究Ⅱ；诱变株选育及产酶条件（J）微生物学报，1990，30（2）：129-133.

[7]裘娟萍，提高堿性蛋白酶生产效益的措施（J）.氨基酸和生物资源.1996，18（2）：32-35.

[8]冯清平，沈剑敏，高燕.紫外线诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究（J）.兰州大学学报（自然科学报）.1994，30（04）：83-87.

[9]沈萍，陈向东.微生物实验（M）.4版.北京.高等教育出版社.2007.189-190.

[10] 张晶，王战勇，韩玉，牛加铸 . 碱性蛋白酶产生菌株的筛选及鉴定（J）.2006（10）-0042-02.

[11] 张晶，王战勇，韩玉，牛加铸. 碱性蛋白酶产生菌株的筛选及鉴定（J）.2006（10）-0042-02.

[12]吴根福. 发酵工程实验指导（M）.2版.北京.高等教育出版社，2013，27-28.

通讯作者：唐蕊（教授）