红花龙胆化学成分研究

[摘要] 目的：研究龙胆属红花龙胆Gentiana rhodantha全草的化学成分。方法：采用硅胶，MCI，Sephadex LH-20，RP C₁₈柱色谱分离等方法对化合物进行纯化，并通过MS和NMR等波谱分析方法鉴定化合物的结构。结果：从中分离并鉴定了16个化合物，分别为10个酚性化合物：1，3，7，8-四羟基酮（1），rhodanthenone D（2），1，3，6，7-四羟基酮（3），1，3，7-三羟基-4，8-二甲氧基酮（4），槲皮素（5），异荭草素（6），芒果苷（7），1-O-β-D-吡喃葡萄糖-3，7，8-三羟基酮（8），没食子酸乙酯（9），水杨酸（10）；6个三萜类化合物：α-香树素（11），3-O-棕榈酸酯高根二醇（12），熊果醛（13），3-O-乙酰氧基熊果醇（14），熊果酸（15），2α-羟基-熊果酸（16）。结论：化合物9，13，14为首次从龙胆科中分离得到，化合物1，3为首次从龙胆属中分离得到，化合物4～6，8，10～12，15，16为首次从该植物中分离得到。

[关键词] 龙胆属；红花龙胆；化学成分；结构鉴定

红花龙胆Gentiana rhodantha Franch.为龙胆科多年生草本植物，分布于四川、广西、云南、陕西、甘肃、河南、湖北等地区，其全草具清热利湿、凉血解毒之功效，民间常用于治疗肺炎及肝胆疾病[1]。目前有关红花龙胆的化学成分研究已有报道[2-6]，但是很不深入，为了更合理的开发利用红花龙胆植物资源，作者对该药用植物进行了系统的化学成分研究，从红花龙胆全草中分离鉴定了16个单体化合物，其中化合物9，13，14为首次从龙胆科中分离得到，化合物1，3为首次从龙胆属中分离得到，化合物4～6，8，10～12，15，16为首次从该植物中分离得到。

1 材料

X-24型显微熔点仪，温度未校正；Bruker ACF-300，500核磁共振仪（TMS为内标）；Agilent 1100 MSD Trap质谱仪；MCI gel（CHP20P，75～150 μm）日本三菱化学公司生产；Sephadex LH-20和RP C₁₈购自Pharmacia公司；薄层和柱色谱硅胶（100～200，200～300目）为青岛海洋化工厂生产；所用试剂均为分析纯（江苏汉邦科技有限公司）。

样品2011年7月采自云南红河州屏边县，原植物经中国药科大学秦民坚教授鉴定为龙胆科龙胆属植物红花龙胆G. rhodantha，凭证标本（No. Gr-201107）保存于中国药科大学中药资源学教研室。

2 提取和分离

10.0 kg红花龙胆干燥全草粉碎，95%乙醇（75 L×3）渗漉，渗漉液减压浓缩，浸膏加水混悬，石油醚萃取、脱脂后浓缩水层得浸膏（600 g）。硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇（100∶1～0∶1）梯度洗脱，依次分离得到8个流分（Fr. 1～Fr. 8）。流分Fr. 2经硅胶（石油醚-乙酸乙酯 50∶1～0∶1），MCI柱色谱（甲醇-水0∶100～100∶0），Sephadex LH-20（氯仿-甲醇 1∶1）柱反复分离纯化得化合物9（5 mg），11（29 mg），12（14 mg），13（13 mg），14（10 mg）； Fr. 3经硅胶（石油醚-乙酸乙酯 10∶1～0∶1），MCI，Sephadex LH-20（氯仿-甲醇 1∶1）柱反复分离纯化得化合物10（20 mg），15（50mg），16（8 mg）；Fr. 4经硅胶（石油醚-丙酮 20∶1～0∶1），Sephadex LH-20（氯仿-甲醇 1∶1） 柱反复分离纯化得化合物1（20 mg），2（40 mg），3（15 mg），4（6 mg）；Fr. 5经Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱色谱及甲醇反复重结晶处理得得化合物5（8 mg），8（10 mg）。Fr. 6经ODS柱色谱（甲醇-水0∶100～100∶0），甲醇反复重结晶处理得化合物6（34 mg），7（200 mg）。

3 结构鉴定

化合物1 黄色针晶（甲醇），mp>300 ℃。ESI-MS m/z 259[M-H]^-。¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz） δ： 11.88（1H，s，1-OH），11.72（1H，s，8-OH），11.26（1H，s，3-OH），9.31（1H，s，7-OH），7.27（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），6.89（1H，d，J=8.9 Hz，H-5），6.34（1H，d，J=2.0 Hz，H-4），6.19（1H，d，J=2.0 Hz，H-2）。以上数据与文献[7]报道一致，确定该化合物为1，3，7，8-四羟基酮。

化合物2 黄色无定形粉末（甲醇）。ESI-MS m/z 289[M-H]^-。¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz） δ： 11.72（1H，s，8-OH），11.64（1H，s，1-OH），11.07（1H，s，3-OH），9.35（1H，s，7-OH），7.29（1H，d，J=8.9 Hz，H-5），6.97（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），6.28（1H，s，H-4），3.79（6H，s，2-OCH₃）。以上数据与文献[6]报道一致，确定该化合物为rhodanthenone D。

化合物3 黄色无定形粉末（甲醇），mp 370～372 ℃。ESI-MS m/z 259 [M-H]^-。¹H-NMR（CD₃OD，500 MHz） δ： 7.43（1H，s，H-5），6.80（1H，s，H-8），6.28（1H，d，J=2.2 Hz，H-4），6.14（1H，d，J=2.2 Hz，H-2）；¹³C-NMR（CD₃OD，125 MHz） δ： 181.1（C-9），166.3（C-3），164.3（C-1），159.4（C-4a），155.3（C-7），153.3（C-6），144.8（C-5a），113.8（C-8a），109.2（C-8），103.6（C-5），103.5（C-9a），98.8（C-2），94.7（C-4）。HMBC δ： 7.43与181.1，155.3，153.3，144.8，113.8，103.6 相关；δ 6.80与181.1，155.3，153.3，144.8，113.8 相关；δ 6.28与166.3，159.4，103.4，98.8 相关；δ 6.15与166.3，164.3，103.4，94.68相关。以上¹H-NMR数据与文献[8]报道一致，根据HMBC谱，确定该化合物为1，3，6，7-四羟基酮。