河川沙塘鳢雌雄亲鱼肌肉中脂肪酸含量的比较研究

摘要 [目的] 对河川沙塘鳢雌、雄鱼亲鱼肌肉中脂肪酸含量进行比较。[方法] 以不同生殖时期（III、IV和V期）的河川沙塘鳢雌、雄鱼亲鱼为研究对象，采用氯仿-甲醇溶液抽提法和气相色谱法分析其肌肉脂肪酸组成的变化。[结果] 在雌、雄亲鱼肌肉中检测到27种脂肪酸，不饱和脂肪酸含量丰富。在河川沙塘鳢雌鱼肌肉中n-3系列脂肪酸含量基本保持不变，n-6系列脂肪酸含量在III期达到最高值，在V期达到最低值，n-6系列脂肪酸主要被用于卵巢的发育。在河川沙塘鳢雄鱼肌肉中，在IV期n-6系列脂肪酸含量达到最大值，为精巢的发育储存能源。雌、雄亲鱼肌肉中n-3系列脂肪酸含量大于n-6系列脂肪酸。[结论] 该研究为开展河川沙塘鳢的人工增养殖提供理论指导。

关键词 河川沙塘鳢；脂肪酸含量；雌、雄亲鱼；比较

中图分类号 S965.199 文献标识码

A 文章编号 0517-6611（2014）03-00798-03

Abstract [Objective] The research aimed to compare the content of fatty acid in the muscles of female and male Odontobutis potamophila. [Method] Taking female and male ontobutis potamophila in different reproductive stages（III，IV and V stages） as the research objects， the changes of fatty acid composition in the muscles were analyzed by using chloroform-methanol extraction method and gas chromatography.[Result] 27 kinds of fatty acids were detected in the muscles of male and female O. potamophila and there was rich unsaturated fatty acids in the muscles. The content of n-3 fatty acids remained unchanged in the muscles of female O. potamophila. The content of n-6 fatty acids reached the maximum at III stage and the minimum at V stage. n-6 fatty acids were mainly used the development of ovaries. In the muscles of male O. potamophila， the content of n-6 fatty acids reached the maximum at IV stage， which stored energy for the development of testis. The content of n-3 fatty acids in the muscles of female . potamophila was higher than that of n-6 fatty acids. [Conclusion] The research provided theoretical guide for the artificial culture of O. potamophila.

Key words Odontobutis potamophila；Fatty acid content；Male and female fish；Comparison

河川沙塘鱧（Odontobutis potamophila），隶属鲈形目（Perciformes）沙塘鳢科（Odontobutidae），分布在我国长江中下游及其支流、钱塘江水系、闽江水系等，是我国江苏太湖地区最为常见的底栖肉食性经济鱼类，深受沿海地区人们的喜爱[1-2]。大力发展河川沙塘鳢的人工增养殖具有重要的经济意义。目前，有关河川沙塘鳢的研究主要集中在早期发育[3-6]，其中脂类含量及脂肪酸组成的研究主要集中在胚胎和仔鱼时期[7]，而对亲鱼的脂类含量及脂肪酸组成的研究较少。笔者以不同生殖时期的河川沙塘鳢雌、雄鱼亲鱼为研究对象，分析其肌肉的脂肪酸组成的变化，旨为开展河川沙塘鳢的人工增养殖提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为河川沙塘鳢雌、雄亲鱼，2012 年 4 月自上海市铜川路水产品集贸市场购买。根据性腺发育周期，分别在III、IV和V期各取样 8 尾，取其背部肌肉保存于-80 ℃低温冰箱中，待测。

1.2 试验方法

1.2.1 脂肪酸组分的测定。参照国家标准GB/T22223-2008，采用水解提取-气相色谱法测定。

1.2.1.1 脂肪酸的提取。准确称取均匀捣碎的样品1 g，置于玻璃离心管内，依次加氯仿 20 ml、甲醇10 ml、水 2 ～ 3 ml，盖上盖子，超声 10 min 后再振荡 2 h。静置 22 h 后，3 500 r/min 离心 10 min，分层后取下层氯仿层，过滤纸 （滤纸上放 20 g 烘干过的无水硫酸钠） ，滤液置于干燥的烧瓶中，在真空干燥箱内烘干。

1.2.1.2 脂肪酸的甲酯化。在盛有脂肪提取物的烧瓶 （250 ml） 中加入2%氢氧化钠溶液8 ml，接连回流冷凝器于 80 ℃水浴回流，直至油滴消失； 从回流冷凝器上端加入 15% 三氟化硼甲醇溶液 7 ml，在80 ℃ 水浴中继续回流 2 min； 用去离子水冲洗回流冷凝器。停止加热，从水浴锅上取下烧瓶，迅速冷却至室温，准确加入正庚烷10 ～30 ml，振摇2 min，再加入饱和氯化钠水溶液，静置分层。吸取上层正庚烷提取溶液 5 ml，转移至小型试管 （30 ml） 中，加入无水硫酸钠 3 ～5 g，振摇 1 min，静置 5 min，吸取上层溶液到进样瓶中，待测。

1.2.1.3 色谱测定。取脂肪酸甲酯标准溶液 1.0 μl和各单个脂肪酸甲酯标准溶液注入气相色谱仪，测定标准溶液的响应值 （峰高或峰面积），得到每个脂肪酸甲酯的相对保留时间和气相色谱图。取1.0 μl样液注入气相色谱仪，测定试样的响应值（峰高或锋面积），经过与标准溶液谱图比较响应值得到试样中脂肪酸甲酯的含量。

1.2.2 数据处理。利用 Excel 2003软件对试验数据进行统计与分析，文中描述性统计值用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

由表1可知，

在生殖期河川沙塘鳢雌、雄亲鱼的肌肉中共检测到27种脂肪酸，其中，饱和脂肪酸8种，单不饱和脂肪酸7种，多不饱和脂肪酸12种[8]。在河川沙塘鳢雌鱼亲鱼肌肉中饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的33.37%～35.26%，含量较高的种类是C16∶0和C18∶0；单不饱和脂肪酸含量占总脂肪含量的20.71%～23.95%，含量较高的种类是C16∶1和C18∶1n9c；多不饱和脂肪酸含量占总脂肪含量的42.68%～45.09%，含量较高的种类是C22∶6n3和C20∶4n6；其中n-3、n-6系列脂肪酸含量分别占总脂肪酸含量的21.99%～22.61%和18.67%～20.91%，n-3系列脂肪酸含量与n-6系列脂肪酸含量的比值均大于1。在河川沙塘鳢雄鱼亲鱼肌肉中饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的33.50%～34.59%，单不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的22.82%～23.35%，多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的42.59%～43.15%，其中n-3、n-6系列脂肪酸含量分别占总脂肪酸含量的23.38%～26.68%和14.04%～16.91%，n-3系列脂肪酸含量与n-6系列脂肪酸含量的比值均大于1。

在河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉中，河川沙塘鳢雌鱼亲鱼饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的比例整体上呈先降低后上升的趋势，其中C20∶0和C24∶0的含量在III期为0。河川沙塘鳢雄鱼亲鱼饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的比例在III期最低，进入IV期明显增加，V期没有显著变化，其中C14：0、C15∶0和C16∶0含量呈上升趋势。河川沙塘鳢雌鱼单不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的比例整体上呈上升趋势，其中C16∶1含量呈先下降后上升趋势，C20∶1n9含量呈先上升后下降的趋势，C22∶1n9只存在于V期中。河川沙塘鳢雄鱼单不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的比例整体上呈先下降后上升的趋势，其中C16∶1和C24∶1n9含量呈先上升后下降趋势，C17∶1含量呈上升趋势，C18∶1n9t之存在于III期中。河川沙塘鳢雌鱼多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量呈下降趋势，其中C18∶3n6只存在于V期，Ⅲ期C22∶2的含量为0。河川沙塘鳢雄鱼亲鱼饱和脂肪酸含量在III期占总脂肪酸含量最低，在IV期有所增加，V期没有明显变化。

3 讨论

与大多数鱼类一样，在河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉饱和脂肪酸中C16∶0含量最高[9-11]，约为20%，C16∶0是一种基础脂肪酸，能提供能量和转化为其他脂肪酸。各发育时期河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉中的不饱和脂肪酸含量极为丰富[1，12]，其中河川沙塘鳢雌鱼亲鱼肌肉中III～V期不饱和脂肪酸含量分别为65.8%、64.74%和66.63%；河川沙塘鳢雄鱼亲鱼肌肉中III～V期不饱和脂肪酸含量分别为66.5%、65.41%和65.51%。在河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉中不饱和脂肪酸含量最高的是C18∶1n9c，河川沙塘鳢雌鱼在V期达到最高值（15.73%）；河川沙塘鳢雄鱼在III期达到最高值（17.74%）。当食物中PUFA缺乏时，C18∶1n9通过去饱和并加长碳链而合成C20∶3n3，C20∶3n3可以作为体内PUFA缺乏的判断指标[13]。在河川沙塘鳢雌鱼III～V期肌肉中，C20∶3n3的含量均为0，河川沙塘鳢雄鱼IV期肌肉中，C20∶3n3含量为0，III期和V期分别为0.2%和0.29%，且C18∶1n9含量高，说明在河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉中，PUFA含量充足[14]。

绝大数淡水鱼都具有一定的生物转化能力，发育过程中的必需脂肪酸是n-3系列和n-6系列的多不饱和脂肪酸[15]，最主要是C18∶3n3和C18∶2n6[16]。在河川沙塘鳢雌鱼肌肉中，C18∶3n3和EPA含量呈先下降后上升的趋势，DHA呈先上升后下降的趋势；在河川沙塘鳢雄鱼肌肉中C18∶3n3呈先下降后上升的趋势，EPA和DHA呈先上升后下降的趋势。很有可能是在河川沙塘鳢雌鱼IV期肌肉中，C18∶3n3和EPA被用于合成和转化为DHA[17]，在V期DHA被消耗，含量降低；河川沙塘鳢雄鱼IV期肌肉中，C18∶3n3被用于合成EPA和DHA，含量降低，在V期，EPA和DHA被消耗，含量降低。

河川沙塘鳢雌鱼肌肉中，n-3系列脂肪酸含量基本保持不变，n-6系列的脂肪酸含量在III期最高，达到20.91%，在V期最低，只有18.67%，有可能是因为n-6系列的脂肪酸被用于卵巢的发育。在河川沙塘鳢雄鱼肌肉中，n-3系列脂肪酸含量在IV期急剧降低，可能是因为n-3系列的脂肪酸被用于主要的能源物质被消耗掉，而n-6系列的脂肪酸含量达到最大值，为精巢的发育储存能源。河川沙塘鳢雌、雄亲鱼肌肉中，n-3/n-6值在1.08～1.9范围内变动，这符合淡水鱼类的n-3/n-6多不饱和脂肪酸的比例关系[18]。

參考文献

[1] 伍汉霖，吴小清，解玉浩.中国沙塘鳢属鱼类的整理和一新种的叙述 [J].上海水产大学学报，1993，2（1）：52-58.

[2] 孙帼英，郭学彦.太湖河川沙塘鳢的生物学研究 [J].水产学报，1996（3）：193-201.

[3] 胡先成.河川沙塘鳢早期发育过程中的器官发生、营养代谢及其能量收支的研究[D].上海：华东师范大学，2007：1-123.

[4] 胡先成，周忠良，趙云龙，等.河川沙塘鳢孵化腺的发生及孵化酶的分泌[J].动物学报，2007，53 （3）：511-518.

[5] 胡先成，赵云龙 .河川沙塘鳢视觉器官的发育及其与摄食的关系[J].动物学杂志，2007，42 （5）：41-48.

[6] 翁敏婵，郭莎园，胡先成 .河川沙塘鳢早期发育过程中耗氧率及 NH3-N 排泄率的变化[J].重庆师范大学学报，2010（5）：14-18.

[7] 胡先成，赵云龙 .河川沙塘鳢胚胎、仔鱼发育过程中脂类含量及脂肪酸组成的变化[J].淡水渔业，2008（3）：46-50.

[8] 朱嘉洁，胡先成.生殖季节河川沙塘鳢雌鱼亲鱼卵巢的脂类含量及脂肪酸组成变化[J].湖北农业科学，2012，16（8）：47-50.

[9] WATANABE T，ARAKWA T，KITAJIMA C，et al.Effect of nutri-tional quality of broodstock diets on reproduction of red seabream[J].Nippon Saisan Gakkaishi，1984，50： 495-501.

[10] JOHN SARGENT，LESLEY MCEVOY，ALICIA ESTEVEZ，et al.Lipid nutrition of marine fish during early development：current status and future directions[J].Aquaculture，1999，179： 217-229.

[11] 姚俊杰，赵云龙，李川，等.黄颡鱼胚胎发育早期脂肪酸变化的研究[J].水产科学，2009，（11）： 644-647.

[12] 陈 涛，于丹，赵鑫，等.繁殖期雌性江黄颡鱼的脂肪酸组成分析[J].广西农业科学，2010，41（3）： 66-69.

[13] DESVILETTES C，BOURDIER G，BRETON J C.Changes in lipid class and fatty acid composition during development in pike（Esox lucius L.） eggs and larvae[J].Fish Physiol Biochem，1997，16：381～393.

[14] 谢仰杰，孙帼英.河川沙塘鳢的胚胎和胚后发育以及温度对胚胎发育的影响[J].厦门水产学院学报，1996，18（1）：55-62.

[15] SARGENT J R，BELL J G，BELL M V，et al.Requirement criteria for essential[J].Appl Ichthyol，1995，11：183-189.

[16] GUNASEKERA R M，DE SILVA S S，INGRAM B A.Early ontogeny-re-lated changes of the fatty acid composition in the Percichthyid fi-shes trout cod，Maccullochellamacquariensis and Murray cod，M.peelii peelii [J].AquatLiving Resour，1999，12（3）： 219-227.

[17] HENDERSONR J，PARKM T，SARGENT J R.The desaturation and e-longation of14C-labelled polyunsaturated acids by pike（Esox lucius L.）in vivo[J].Fish Physiol Biochem，1995，14： 223-235.

[18] HENDERSON R J，TOCHER D R.The lipid composition and biochem-istry of freshwater fish[J].Prog Lipid Res，1987，26： 281-347.